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      大鼠多巴胺(DA)ELISA檢測試劑盒操作說明

      發(fā)布時(shí)間:2018-02-06   點(diǎn)擊次數(shù):1570次

      人多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒僅供研究使用

       

      人多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/strong>

      本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細(xì)胞上清及相關(guān)液體樣本中人多巴胺D2受體(D2R)的含量。

      有效期:6個(gè)月

      保存條件:2-8℃

       

       

       

      實(shí)驗(yàn)原理

      試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人多巴胺D2受體(D2R)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人多巴胺D2受體(D2R)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

       

       

       

      人多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒組成

      試劑盒組成96孔配置48孔配置備注
      微孔酶標(biāo)板8孔×12條8孔×6條 無
      標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL×6管0.3mL×6管
      樣本稀釋液6mL3mL
      檢測抗體-HRP10mL5mL
      20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進(jìn)行稀釋
      底物A6mL3mL
      底物B6mL3mL
      終止液6mL3mL
      封板膜2張2張
      說明書1份1份
      自封袋1個(gè)1個(gè)

      備注:

      1. 標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為:2400、1200、600、300、150、0 pg/mL

      2. 經(jīng)過大量正常標(biāo)本檢驗(yàn),標(biāo)本的正常濃度值均在試劑盒提供的檢測范圍內(nèi),實(shí)驗(yàn)過程中直接取50μL樣本上樣即可。當(dāng)有部分樣本值超過zui大標(biāo)準(zhǔn)品濃度時(shí),可用樣本稀釋液將標(biāo)本進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。

       

       

       

      樣本處理及要求

      1. 血清:全血標(biāo)本請于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

      2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

      3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

      注:標(biāo)本溶血會影響zui后檢測結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測。

       

       

       

      需要而未提供的試劑和器材

      1. 酶標(biāo)儀(450nm)

      2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

      3. 37℃恒溫箱

      4. 蒸餾水或去離子水

       

       

       

      試劑準(zhǔn)備

      試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

      20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

       

       

       

      操作步驟

      1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

      2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

      3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

      4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

      5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

      6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

      7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

      人多巴胺D2受體(D2R)ELISA試劑盒

      英文名稱:Human D2R ELISA Kit
      實(shí)驗(yàn)類型:夾心法
      檢測范圍:75 pg/mL – 2400 pg/mL
      zui低檢測限:10 pg/mL
      應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實(shí)驗(yàn)室科研及非臨床用途)